發(fā)布時間:2014-04-10來源:朱丹萍 供稿:曾令文組 葛程程、科教處 管韻苗
中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院曾令文研究組研發(fā)出一種快速靈敏檢測組蛋白甲基化的試紙條,相關(guān)成果發(fā)表在Analytical Chemistry上。
組蛋白甲基化是一種重要的表觀遺傳學(xué)修飾,通常發(fā)生在氨基末端的賴氨酸或者精氨酸上,同其它調(diào)節(jié)蛋白和DNA相互作用,參與基因的調(diào)節(jié)和染色質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的形成。細(xì)胞染色質(zhì)中不同類型的組蛋白甲基化具有不同的意義,這往往取決于組蛋白被甲基化的位置和甲基化的程度。常用的在細(xì)胞水平上分析組蛋白甲基化的方法是western blot,檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠,但是操作時間長(一到兩天),步驟繁瑣,使用的試劑毒性很大。因此,研發(fā)一種方便快速的方法用于組蛋白甲基化的檢測具有重要意義。
研究人員采用信號增強(qiáng)的試紙條生物傳感器用于組蛋白甲基化的檢測。有別于傳統(tǒng)的試紙條,這種新型的試紙條中引入了一個信號增強(qiáng)探針(AuNP-DNA),實現(xiàn)了對檢測信號的進(jìn)一步放大。選擇HeLa細(xì)胞中的組蛋白H3K9三甲基化(me3)作為研究對象,在0.02ug的HeLa細(xì)胞組蛋白提取液中就能檢測到,比傳統(tǒng)的試紙條和western blot的靈敏度分別提高了10倍和15倍。該方法簡便快速,實驗結(jié)果在15分鐘內(nèi)用肉眼就能觀察到,避免了western blot的操作步驟復(fù)雜,操作時間長等缺點。這個方法同樣適用于其他類型的組蛋白甲基化,乙?;揎椀龋哂衅毡檫m用性。
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